井伊直虎是远江井伊谷城主(中国人)井伊直盛的女儿，母亲是新野亲矩之妹佑春尼。幼名不明，出生年份不明，推测天文五年(1536年)前后诞生。
早年出家
天文11年(1542年)，井伊直虎的祖父井伊直宗今川义元命令参加三河国田原城的攻城战。父亲井伊直盛没有儿子，打算把表弟井伊直亲(直盛的叔叔井伊直满的儿子)当作丈夫的养子。
天文学13年(1544年)，井伊家老小野道高(政直)的诽谤，井伊直亲的父亲井伊直满及其弟弟井伊直义被怀疑要向今川义元谋自杀，因此直亲逃到了信浓国。井伊直亲逃亡期间，井伊直虎(以前不为人知)出家为尼，被命名为次郎法师。
弘治元年(1555年)，井伊直亲在道高死后一年才回到今川家。然而，在信浓期间，他娶了奥山王朝的女儿(另一个是奥山王朝的利润)，所以他不得不终止与次郎法师的婚约。
[img]370134' />
3年(1560年)5月，井伊直盛在桶狭之战中战死。
永禄五年(1562年)，井伊直亲继承了家督，但小野道好(道高之子)的诽谤却被今川氏杀害。井伊一族在叔叔新野亲矩的支持下获救(次郎法师的母亲佑春尼的兄弟)。
永禄6年(1563年)，曾祖父井一直平在进攻天野的狗居城的路上去世。根据《井一直平公御一代记》(详见井一家传记)的记载，他喝了连龙妻子田鹤芳(春姬)的毒茶后死于牵马城(1570年德川家康入城后更名为滨松城)。
永禄7年(1564年)，由于川氏势头不断下降，导致饭后连龙等人叛乱。代表今川讨伐牵马城(引间城)的新野亲矩和直盛大臣中野直被杀。龙潭寺居住的叔叔南西瑞文得知后，将直亲幼子虎松(后来井伊直政)移送凤来寺。
[img]370135' />
继任家主
永禄8年(1565年)，因为家里没有男丁，次郎法师还庸俗，以井伊直虎男儿的名义继承了井伊家督的位置。
永禄11年(1568年)，小野道进攻井伊谷城。同年，由于小野专横，井伊谷三人(近藤康用、铃木重时、菅沼忠久)寻求德川家康的帮助。12月15日，德川家康远州入侵。在家康的帮助下，井伊直虎获得了实权，小野道开始逃跑。然后井伊攻入引间城复仇(丈夫死后，成为城主的田鹤方自杀)。
元龟元年(1570年)，德川家康追究小野道好陷害直亲，处死被捕的小野道好。
元龟三年(1572年)秋，武田新玄部将山县昌景攻略井伊谷城，井伊直虎在井平城防守失败后逃往邦松城。之后，滨松城的织田德川联合军在三方原合战和第二年的野田城战役中被武田军打败。
四年(1573年)四月，武田信玄病倒，武田军撤退，井伊直虎夺回井伊谷城。
[img]370136' />
在井伊直虎担任城主期间(1565年起)，收直亲的遗儿虎松(井伊直政)为养子。
天正3年(1575年)，15岁的井伊直政以300石出仕德川氏。
天正10年8月26日(1582年9月12日)，井伊直虎病逝，家督由21岁的井伊直政继承。埋在井伊家的龙潭寺，与直亲合墓。
井伊直虎：日本战国时期的女性领袖